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高中生物专题2细胞工程2.2动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术课件新人教版选修3

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同学们: 上课前,课桌摆放整齐,不乱放与本
节课无关的东西。
上课时,要坐端正,专心听讲,积极 思考,踊跃发言。
下课后,要规整好自己的笔记,做到 学*用心。
准备上课啦!!!

[学*目标] 1.结合教材图 2-16 及相关内容,归纳动物细胞培养的过程、 条件及应用。
2.结合教材图 2-21,归纳通过动物体细胞核移植技术克隆动 物的过程。
3.简述体细胞核移植技术的应用前景。

设疑 激趣 导入 如图为克隆动物明星—“多利”,它是科学家运用动物细胞核 移植技术培育的,今天我们就来学*动物细胞工程的有关内容。

自主 互动 探究 探究点一 动物细胞培养
动物细胞培养就是从动 物机体中取出相关的组织,将它 分散成单个细胞,然后,放在适 宜的培养基中,让这些细胞生长 和增殖。观察下图,探讨动物细 胞培养的相关问题。

1.过程 取动物组织块 ↓ 分散组织细胞:剪碎,用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间 ↓ 制成细胞悬液 ↓ 原代培养:具有贴壁生长和接触抑制的特点 ↓

??①先用胰蛋白酶等处理贴满瓶壁的细胞

? 再分瓶继续培养

??②10代以内的细胞可保持正常的二倍体

传代培养???③核 细型 胞传到10~50代左右时,增殖会逐

? 渐缓慢,以至于完全停止,但少数细胞

? ?

的细胞核型可能发生改变,克服细胞

?? 寿命的自然极限,获得不死性

(1)动物细胞培养时应选用幼嫩的动物组织块(幼嫩的还是衰老 的),因为幼嫩组织块容易增殖。动物细胞培养的原理是细胞增殖。
(2)将组织分散成单个细胞的方法是从健康动物体内取出组织 块,剪碎,用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间,这样组织就会 分散成单个细胞。先剪碎组织的目的是增大胰蛋白酶或胶原蛋白酶 与细胞的接触面积。
(3)原代培养与传代培养:通常将动物组织消化后的初次培养称 为原代培养;贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分 瓶继续培养,让细胞增殖,即为传代培养。
(4)细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时, 细胞停止分裂增殖的现象。

2.条件 (1)无菌、无毒的环境:即对培养液和所有培养用具进行无菌处 理。
(2)营养:合成培养基的成分为糖、氨基酸、促生长因子、无机 盐、微量元素、血清、血浆等。与植物组织培养基比较,动物细胞
培养基的独特之处:①液体培养基;②其成分中有动物血清。 (3)温度和 pH:适宜的温度为 36.5±0.5℃;pH 为 7.2~7.4。 (4)气体环境:进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,
将其置于含 95%空气加 5%CO2 的混合气体的培养箱中进行培养。 其中 CO2 的主要作用是维持培养液的 pH。

3.应用 (1)生产有重要价值的生物制品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆 抗体等。
(2)为皮肤大面积烧伤病人培养供移植的皮肤。 (3)用于检测有毒物质。 (4)科学家培养各种正常或病变的细胞,用于生理、病理、药理 等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据。

小贴士 (1)细胞株和细胞系 ①细胞株:传代培养的细胞一般传到 10 代左右就不易传下去, 细胞的生长就会出现停滞,大部分细胞衰老死亡。但是有极少数细 胞能度过“危机”而继续传下去,这些存活的细胞一般能传到 40~ 50 代,这种传代的细胞叫做细胞株。 ②细胞系:当细胞株传至 50 代以后又会出现“危机”,不能 再传下去。但有部分细胞的遗传物质发生了改变,而且带有癌变的 特点,获得不死性,可在培养条件下无限制地传代下去,这种传代 的细胞称为细胞系。

(2)癌变的细胞无接触抑制现象,可以堆叠起来增殖。 (3)用胰蛋白酶处理组织块,可使细胞分散开,目的是使细胞与 培养液充分接触。不能使用胃蛋白酶分散细胞,因为多数动物细胞 培养的适宜 pH 为 7.2~7.4,此 pH 下胃蛋白酶不具活性。

1.动物细胞培养流程图:

2.动物细胞培养和植物组织培养的比较

动物细胞培养

植物组织培养

原理

细胞的增殖

细胞的全能性

细胞 来源

胚胎或幼龄动物组织或器官 离体植物器官、组织或细胞

培 养

状态 成分

基 组成

液体

固体

合成培养基

合成培养基

葡萄糖、氨基酸、无机盐、 矿质元素、蔗糖、维生素、

维生素、动物血清

植物激素、有机添加物

器皿

培养瓶

锥形瓶

过程

原代培养,传代培养 更换培养基,细胞增殖分化

生长 特点
接种前 处理
培养条件
培养 目的
培养 结果

贴壁生长,细胞增殖不分化

诱导形成愈伤组织,细胞增 殖分化

细胞进行异养需氧代谢

灭菌、用胰蛋白酶处理,使 组织分散成单个细胞

灭菌

恒温、无菌、无需光照

常温、无菌、光照条件

①生产蛋白质生物制品 ①快速繁育无病毒植株

②获取大量细胞

②生产药物、食品添加剂、

③检测有毒物质

香料、色素、杀虫剂等

细胞株→细胞系

愈伤组织→植株

1.判断下面关于动物细胞培养的叙述的正误。 (1)动物细胞培养的原理是动物细胞的全能性。( × ) (2)需要对细胞进行一次脱分化处理和两次蛋白酶处理。( × )
(3)原代培养的细胞是指从贴壁生长到发生接触抑制的细胞。 (× )
(4)恒温条件下,细胞周期持续时间长短不随细胞培养进程而改
变。( × )
(5)传代培养的细胞因为以有丝分裂方式增殖,所以在传代过程 中其遗传物质保持不变。( × )

(6)只要培养条件适宜,细胞都可在体外无限繁殖。(× ) (7)可用于检测有毒物质、构建人造皮肤、大量生产药物蛋白。 (√ ) (8)为了防止培养过程中发生微生物污染,应将培养箱抽成真空 以消毒、灭菌。( × )

解析:动物细胞培养的原理是细胞的增殖;动物细胞培养无需 脱分化处理,只要发生接触抑制就要用胰蛋白酶处理;细胞从开始 贴壁生长到发生接触抑制在原代培养和传代培养中都会发生;多次 传代后,分裂速度减慢,周期因此变长,以致有部分细胞的遗传物 质有可能发生改变;细胞多次传代后,大多数细胞会逐渐衰老死亡; 培养箱抽成真空不利于细胞呼吸。只有(7)正确。

2.某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定 药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞
为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培
养的问题。
(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养 液及其他培养条件均相同。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细 胞数量___多_____。
(2)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其 原因是_血__清__可__以__补__充__合__成__培 __养 __基 __中 __缺 __乏 ___的__物__质________________
________。细胞培养应在含 5%CO2 的恒温培养箱中进行,CO2 的作用是__维__持__培__养__液__的__p_H_________________________________。

(3) 在 两 种 细 胞 生 长 过 程 中 , 当 乙 细 胞 铺 满 瓶 壁 时 , 其 生 长 ___停__止___。药物试验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比 乙细胞可以传代的次数更____多____。若用动物的肝脏组织块制备肝 细胞悬液,需要使用_胰__蛋__白__酶_处理。
(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适 量的__抗__生__素__。

思路点拨:由题干可获取的信息有:①试验材料是肝细胞;② 肝细胞有两种,一种是肝肿瘤细胞,一种是正常的肝细胞。解答本 题时需明确动物细胞培养的过程、条件及应用,再结合每小题作答。

解析:癌细胞具有无限增殖的特点,故相同培养条件下,肝肿 瘤细胞数量多于正常肝细胞数量。动物细胞培养需提供无菌环境, 如向培养液中加入适量的抗生素可防止细菌的污染;需提供一定的 营养,如向培养基中加入适量血清,以便补充合成培养基中缺乏的 物质;需提供一定的气体环境,如向恒温培养箱中加入 5%的 CO2, 目的是维持培养液的 pH。

探究点二 动物体细胞核移植技术和克隆动物
用动物细胞克隆动物,实际上是通过核移植来实现的。依据克 隆动物的基本流程,回答问题。
1.概念:是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉 细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的 胚胎最终发育为动物个体。
2.种类?????胚 体胎 细细 胞胞 核核 移移 植植 ?难?易 ? ?

3.克隆动物的基本流程

(1)原理:动物细胞核的全能性。 (2)供体和受体的选择 ①供体:一般选用传代 10 代以内的细胞,因为 10 代以内的细 胞一般能保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞正常的遗传基 础。 ②受体:去核的 MⅡ中期的卵母细胞。 a.选取 MⅡ中期的卵母细胞的原因:一方面细胞大,易于操 作;卵黄多,营养丰富,为发育提供充足的营养。另一方面此时具 备受精能力,细胞质中含有能刺激融合后重组细胞进行分裂分化并 形成重组胚胎的物质。 b.去核的原因:保证克隆动物的遗传物质最大程度地来自有 重要利用价值的动物。

4.克隆动物性状与供体并不完全相同的原因 (1)克隆动物的细胞质遗传物质来自受体卵母细胞的细胞质。 (2)生物的性状不仅与遗传物质有关,还受环境的影响。 5.应用 (1)加速家畜遗传改良进程,促进优良畜群繁育。 (2)增加濒危动物数量,保护濒危物种。 (3)生产医用蛋白。 (4)作为异种移植的供体。 (5)用于组织器官的移植。

6.存在的问题 (1)体细胞核移植技术的成功率非常低。 (2)克隆动物存在健康问题,表现出生理缺陷、遗传缺陷等。 (3)克隆动物食品的安全性问题存在争议。

动物细胞核移植的条件及结果 (1)核移植一般不选择生殖细胞作为供核细胞,因为生殖细胞与 正常体细胞相比,遗传物质减半。 (2)核移植时,一般先用电刺激使供、受体细胞融合,再用物理 或化学方法激活受体细胞,使其完成细胞分裂和发育进程。 (3)核移植过程中细胞核只来自于一个个体,因此核遗传物质与 供核个体的相同,属于无性繁殖,产生新个体的绝大多数性状与供 核亲本一致。体细胞核移植技术中注入去核卵母细胞中的不是供体 细胞核,而是整个细胞,伴随着两细胞融合,体现细胞膜的结构特 点——具有一定的流动性。 (4)该技术形成重组细胞发育成一个新个体,体现了细胞核的全 能性而非动物细胞的全能性。

1.下列对哺乳动物体细胞核移植技术的描述不正确的是( ) A.该技术的难度明显高于胚胎细胞核移植 B.通常采用减数第二次分裂期卵母细胞作为受体细胞 C.可通过显微操作法除去卵母细胞核 D.克隆动物是对提供体细胞核的动物进行了完全复制
解析:克隆动物的性状与核供体生物的性状基本相同,但不是 完全相同。
答案:D

2.乙马的卵细胞核被甲马的体细胞核置换后,这个卵细胞经 过多次分裂发育成重组胚胎,再植入丙马的子宫内发育,结果产下 一匹小马。下列叙述正确的是( )
A.直接在体外对甲马的体细胞进行诱导也能培养出胚胎 B.小马的性状与甲马完全相同 C.此项技术可用于保护濒危物种 D.该过程可以很好地证明动物细胞的全能性
解析:克隆过程中细胞质遗传物质来自一方,而细胞核中遗传 物质来自另一方,所以小马的性状与甲马不完全一致。该过程只能 说明动物细胞核具有全能性,而不能证明动物细胞的全能性。
答案:C

3.关于克隆,除个体水*外,还有分子、细胞、器官等水* 的克隆。下列不属于克隆技术的是( )
A.从出生不久的小鼠心脏取下的细胞在体外离体培养成细胞 系
B.使某些特定的外源基因在哺乳动物体内表达 C.农业生产上利用马铃薯的芽繁殖马铃薯 D.将单个 B 淋巴细胞进行无性繁殖
解析:克隆实质上就是一种无性繁殖,题中 A、D 两项都是细 胞水*的克隆,C 项是指植物的营养生殖,也属于克隆的范畴。B 项中,使某些特定的外源基因在哺乳动物体内表达,这属于转基因 技术。
答案:B

4.一只羊的卵子的核被另一只羊的体细胞核替换后,这个卵 子经过多次分裂,再植入第三只羊的子宫内发育,结果生下了一只
羊羔,这种克隆技术具有多种用途,但是不能( ) A.有选择地繁殖某一性别的家畜 B.繁殖家畜中的优秀个体 C.用于保存物种 D.改变动物的基因型

解析:生物的各种性状是由遗传物质——DNA 控制的,由细 胞核内的 DNA 控制的遗传叫细胞核遗传,由细胞质(主要存在于线 粒体、叶绿体)内的 DNA 控制的遗传叫细胞质遗传。目前的克隆技 术是将一个体细胞核植入一个去核的卵母细胞中,经过试管培养一 段时间后,再移入另一个体的子宫内发育、分娩的技术。通过该技 术,能够保持新的优良性状,能够保持性别不变,也能够用于保存 物种,但不能改变动物的基因型,这是因为基因型的改变一般是通 过动物的有性生殖(减数分裂)完成的。
答案:D

探源 揭秘 高考
例 (2016·课标卷Ⅱ生物)[生物——选修 3:现代生物科技专 题](15 分)
下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的 流程。

回答下列问题:
(1)图中 A 表示正常细胞核,染色体数为 2n,则其性染色体的 组成可为__X_X__或___X_Y_____。过程①表示去除细胞核,该过程一般要 在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用__显 __微 __操 ___作_____ 的方法。②代表的过程是__胚__胎__移__植________。
(2)经过多次传代后,供体细胞中遗 __传 ___物__质_的稳定性会降低。因 此,选材时必须关注传代次数。
(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质 的角度分析其原因是____________________________________。
卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响 (4)与克隆羊“多莉(利)”培育成功一样,其他克隆动物的成功
获得也证明了_动__物__已__分__化__体__细__胞__的__细__胞__核__具__有__全__能__性___________。

解析:(1)哺乳动物的正常细胞核中性染色体的组成为 XX(雌性) 或 XY(雄性)。卵母细胞需培养至减数第二次分裂的中期时,常采用 显微操作法去除细胞核。【1】(2)细胞培养过程中,经过多次传代培养, 细胞中遗传物质的稳定性会降低。因此,选材时一般选 10 代以内 的细胞,以保证细胞正常的二倍体核型。【2】(3)由于卵母细胞质中的 遗传物质会对克降动物的性状产生影响,所以获得的克隆动物与供
体动物性状不完全相同。(4)克隆羊“多莉(利)”以及其他克隆动物 的培育成功,证明了已分化的动物体细胞的细胞核仍具有全能性。

[高考 VS,教材] 真题探源 【1】教材第 49 页:目前核移植技术中普遍使用的 去核方法是显微操作去核法。 【2】教材第 46 页:目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为 10 代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。 考情揭秘 高考对本节相关知识的考查单科卷中有选择题和 非选择题形式,理综试卷中多以选做中的非选择题形式呈现,大多 结合具体的实例从基本原理、操作方法和应用等角度进行考查,并 常与基因工程的内容结合在一起进行综合考查。

美国威斯康星州的一个奶牛场有一头奶牛,年产奶量达 30.8 t, 我国奶牛产量年*均水*仅为 3~4 t。某人用该高产奶牛的耳朵细 胞,采用核移植技术获得高产奶牛(如图)。据图回答下列问题:

(1)③ 过 程 中 选 择 去 核 卵 母 细 胞 作 为 受 体 细 胞 的 原 因 是 __卵__母__细_胞 __体 __积 __大 __,__易__操__作__,_营__养__物__质__丰__富__,__且_细 __胞 __质 __中__含__有__激__发_ 细
胞核__全__能_性 __表 __达 __的__物__质____________________________________。
(2)④过程所利用的技术是_动 __物 ___细__胞__培__养________,其原理是 __细__胞__增__殖________________________________________。
(3) 该 实 验 的 成 功 说 明 已 分 化 的 耳 朵 细 胞 的 细 胞 核 中 含 有 与 __受__精__卵__一样的全套基因,这种繁殖方式属于无__性__繁__殖__。
(4)若研究发现该高产奶牛线粒体发达,故它的产奶量高,则小 牛 d 成 年 后 具 有 这 一 优 良 性 状 吗 ? _不 __具 __有 ___ 。 你 的 依 据 是 _线__粒__体__中 __的 __基 __因 __一 __般 ___通__过__细__胞__质__传__递__给__后__代__,_而 __小 __牛 ___d__的__细__胞_ 质 主要_来__自 __于 __牛 ___a_________________________________________。

解析:(1)在核移植中常用去核卵母细胞作为受体细胞,是因为 卵母细胞内含有丰富的营养物质;体积比较大,容易操作。(2)④过 程属于动物细胞培养,其原理是细胞增殖。(3)该实验的成功证明了 动物细胞核具有全能性,因为细胞核中含有和受精卵一样的全套基 因。(4)线粒体位于细胞质中,主要来源于受体细胞,因此没有产奶 量高的优良性状。

归纳 提升 素养 【网络建构】

【主干落实】 1.动物细胞工程的常用技术有动物细胞培养、动物细胞核移 植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等,其中动物细胞培养是基础。 2.原代培养和传代培养均需用胰蛋白酶对细胞进行分散处理。 3.动物细胞要分散成单个细胞培养,培养液中通常要添加血 清。 4.动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植,因为动物 体细胞分化程度高,恢复其全能性十分困难。 5.动物细胞培养中的两个显著特点是贴壁生长、接触抑制。

释疑 解惑 教材
?教材第 44 页 旁栏思考题 1.提示:用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋 白质。胃蛋白酶作用的适宜 pH 约为 2,当 pH 大于 6 时,胃蛋白酶 就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境 pH 为 7.2~8.4。多数动 物细胞培养的适宜 pH 为 7.2~7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性, 而胰蛋白酶在此环境中活性较高,因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养 时的消化。

?教材第 44 页 寻根问底 提示:胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质外,长时间的作 用也会消化细胞膜蛋白,对细胞有损伤作用,因此必须控制好胰蛋 白酶的消化时间。

?教材第 46 页 旁栏思考题 提示:血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋 白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种,是细胞合成蛋白质的 基本成分,其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成(称为必需氨基 酸),必须由培养液提供。血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生 长因子(如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、类胰岛素生长因子 等);血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活 性物质,能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此,细胞培养时,要 保证细胞能够顺利生长和增殖,一般需添加 10%~20%的血清。

?教材第 46 页 讨论 1.提示:充足的营养供给、适宜的温度、适宜的 pH 和气体环 境。 2.提示:无菌、无毒的环境。

?教材第 49 页 讨论 1.提示:为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重 要利用价值的动物提供的体细胞,在供体细胞的细胞核移至受体细 胞之前,必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。 2.提示:培养的动物细胞一般当传代至 10~50 代左右时,部 分细胞核型可能会发生变化,其细胞遗传物质可能会发生突变,而 10 代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此,在体细胞核 移植中,为了保证供体细胞正常的遗传基础,通常采用传代 10 代 以内的细胞。

3.提示:克隆动物绝大部分 DNA 来自于供体细胞核,但其核 外还有少量的 DNA,即线粒体中的 DNA 是来自于受体卵母细胞。 所以,用教材中所述的方法克隆的动物不是供核动物完全相同的复 制。此外,即便动物的遗传基础完全相同,但动物的一些行为、* 性的形成与所处环境有很大关系,核供体动物生活的环境与克隆动 物所生活的环境不会完全相同,其形成的行为、*性也不可能和核 供体动物完全相同,从这一角度看,克隆动物不会是核供体动物 100%的复制。

?教材第 50 页 思考与探究 1.提示:细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系,细 胞的增殖能力与供体的年龄有关,幼龄动物细胞增殖能力强,有丝 分裂旺盛,老龄动物则相反。所以,一般来说幼年动物的组织细胞 比老年动物的组织细胞易于培养。同样,组织细胞的分化程度越低, 则增殖能力越强,所以更容易培养。

2.提示:脱分化又称去分化,是指分化细胞失去特有的结构 和功能变为具有未分化细胞特性的过程。植物的任何一部分,甚至 单个细胞都具有长成完整植株的能力。但要发育成完整植株,必须 先脱分化,脱分化的细胞具有发育成任何组织的能力,然后进行再 分化,形成完整植株。植物细胞培养主要用于农林生产中的作物、 苗木育种,快速繁育种苗、培育无病毒植株等,这就要求植物的组 织或细胞先进行脱分化。动物细胞的培养有各种用途,一般而言, 动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动物细胞发育潜 能变窄,失去了发育成完整个体的能力,所以,动物细胞也就没有 类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。要想使培养的动物细 胞定向分化,通常采用定向诱导动物干细胞,使其分化成所需要的 组织或器官。

3.(1)提示:可以用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达。 卢辛达的产奶量很高,说明它有高产奶的遗传基础,利用卢辛达的 体细胞克隆的奶牛其遗传物质基本上全部来自该奶牛,其克隆牛具 有高产的遗传基础,如果精心培育和饲养,有可能在世界范围内推 广,克隆牛再与高产的公牛自然繁殖,可得到很多高产的后代,从 而加快奶牛改良进程。但同时需注意,该克隆牛不能无限制地推广, 其数量不宜过多,尤其是在小范围内不能无限的繁殖,以避免奶牛 群出现*亲繁殖而引起种质衰退。

精心制作,敬请观赏

(2)提示:首先从卢辛达耳朵(也可用别的组织、器官,耳朵在 活体上容易取)上剪取一小块组织,在体外培养获得该组织(如软骨 组织)的细胞。从屠宰场取废弃的牛卵巢,抽取卵母细胞体外培养成 熟。用显微针去除卵母细胞的核,再将耳细胞注入卵母细胞,用电 刺激方法使卵母细胞与体细胞融合,这时供体核就进入了受体卵母 细胞,再用电刺激或化学物质激活注入了体细胞核的卵母细胞,使 其完成减数分裂和发育过程。核移植胚胎在体外短时间培养后,挑 选正常卵裂的胚胎植入经同期发情处理的受体母牛体内。

4.提示:在研究方面,克隆动物基因组重新编程的机制尚不 清楚,克隆技术效率低,克隆动物畸形率高、死亡率高、易出现早 衰等问题。这些问题尚在研究中。在应用上,生产克隆动物费用昂 贵,距大规模应用还有一定距离。




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